HiMedia - Antibiotika-Testmedium Nr. 4 (Hefe-MB-Agar) (M140-500G)

Bestimmungsgemäße Verwendung

Empfohlen für den Nachweis von Penicillin G in Milchproben mit Bacillus stearothermophilus .

Zusammensetzung**

Endgültiger pH-Wert (bei 25 °C): 6,6 ± 0,2

Die Formel wurde an die Leistungsparameter angepasst und standardisiert.

# Entspricht Rindfleischextrakt

Wegbeschreibung

26,5 g in 1000 ml gereinigtem/destilliertem Wasser suspendieren. Zum vollständigen Auflösen erhitzen. 15 Minuten bei 15 psi (121 °C) autoklavieren. Auf 45–50 °C abkühlen lassen. Gut mischen und in sterile Petrischalen füllen.

Prinzip und Auslegung

Das Antibiotika-Testmedium Nr. 4 (Hefe-MB-Agar) eignet sich für die Bestimmung der Keimzahl in pharmazeutischen und verwandten Produkten sowie für den mikrobiologischen Nachweis von Antibiotika wie Penicillin in Milch. Dieses Medium ist gemäß den Spezifikationen und Verfahren der US-amerikanischen Arzneimittelbehörde (FDA) (2) formuliert. Es trägt die gleiche Bezeichnung wie das von Grove und Randall (3) vergebene Medium.

Pepton, Hefe und HM-Pepton B liefern die Nährstoffe, die für das Wachstum von Indikatororganismen wie z. B. benötigt werden. Bacillus stearothermophilus , Micrococcus luteus . Dieses Medium ähnelt dem Antibiotika-Testmedium Nr. 2, enthält jedoch zusätzlich Dextrose. Die Dextrose dient als leicht verfügbare Kohlenstoffquelle und fördert so das üppige Wachstum der Testorganismen. Penicillin in Milch wird üblicherweise mit der Zylinderplattenmethode nachgewiesen. Micrococcus luteus als Testorganismus und eine Papierplättchenmethode, wobei Bacillus stearothermophilus . Die Zylinderplattenmethode wird als Standardverfahren zur Quantifizierung von β-Lactam-Rückständen empfohlen. Eine Beschreibung der Zylinderplattenmethode zum Nachweis von Penicillin in Trockenmilchpulver findet sich bei Kramer et al. (3). Das gleiche Grundverfahren wird auch für die Penicillinbestimmung in flüssiger Milch empfohlen.

Für Antibiotika-Tests sollten frisch zubereitete Agarplatten verwendet werden. Die Verwendung dieses Mediums gewährleistet klar definierte Hemmzonen des Testorganismus. Alle Bedingungen des mikrobiologischen Tests müssen sorgfältig kontrolliert werden. Die Verwendung eines Standard-Kulturmediums ist ein wichtiger Schritt für gute Testergebnisse.

Art der Probe

Milchproben

Probenentnahme und -behandlung

Bei Milchproben sind die für die Probenhandhabung geeigneten Techniken gemäß den festgelegten Richtlinien (1,4,7) zu befolgen.

Kontaminierte Materialien müssen nach Gebrauch durch Autoklavieren sterilisiert werden, bevor sie entsorgt werden können.

Warnung und Vorsichtsmaßnahmen

Lesen Sie vor dem Öffnen des Behälters das Etikett. Tragen Sie Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz. Beachten Sie beim Umgang mit Proben und Kulturen die üblichen mikrobiologischen Laborpraktiken. Standardvorkehrungen gemäß den geltenden Richtlinien sind beim Umgang mit Proben zu treffen. Sicherheitshinweise finden Sie in den jeweiligen Sicherheitsdatenblättern.

Einschränkungen

1. Zur vollständigen Identifizierung sind weitere biochemische und serologische Untersuchungen erforderlich.

Leistung und Bewertung

Die Leistungsfähigkeit des Mediums ist zu erwarten, wenn es gemäß den Anweisungen auf dem Etikett innerhalb des Verfallsdatums verwendet und bei der empfohlenen Temperatur gelagert wird.

Qualitätskontrolle

Aussehen Cremefarbenes bis gelbes, homogenes, rieselfähiges Pulver

Gelierung Fest, vergleichbar mit 1,5%igem Agar-Gel

Farbe und Klarheit des zubereiteten Mediums In Petrischalen bildet sich ein gelbes, klares bis leicht trübes Gel.

Reaktion Reaktion einer 2,65 % (w/v) wässrigen Lösung bei 25 °C. pH-Wert: 6,6 ± 0,2

pH 6,40-6,80

Kulturelle Reaktion

Kulturelle Merkmale, die nach einer Inkubation bei 55°C für 18-24 Stunden beobachtet wurden.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 10–30 °C in einem dicht verschlossenen Behälter lagern und stets frisch zubereitetes Medium verwenden. Vor Ablauf des auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatums verbrauchen. Nach dem Öffnen das Produkt trocken und hygroskopisch lagern, die Flasche fest verschließen, um Klumpenbildung zu vermeiden. Unsachgemäße Lagerung kann zu Klumpenbildung führen. An einem trockenen, gut belüfteten Ort lagern, vor extremen Temperaturen und Zündquellen schützen. Behälter nach Gebrauch fest verschließen.

Die beste Produktleistung wird bei Verwendung innerhalb des angegebenen Verfallsdatums erzielt.

Entsorgung

Der Anwender muss die sichere Entsorgung gebrauchter oder unbrauchbarer Zubereitungen dieses Produkts durch Autoklavieren und/oder Verbrennen gewährleisten. Bei der Entsorgung infektiöser Materialien sind die etablierten Laborverfahren einzuhalten. Material, das mit der Probe in Kontakt gekommen ist, muss dekontaminiert und gemäß den geltenden Labortechniken entsorgt werden (3,4).

Referenz

1. Amerikanische Vereinigung für öffentliche Gesundheit, Standardmethoden zur Untersuchung von Milchprodukten, 1978, 14. Auflage, Washington DC
2. Grove und Randall, 1955, Assay Methods of Antibiotics Medical Encyclopedia, Inc. New York.
3. Isenberg, HD Handbuch der klinischen mikrobiologischen Verfahren, 2. ^Auflage Ausgabe.
4. Jorgensen, JH, Pfaller, MA, Carroll, KC, Funke, G., Landry, ML, Richter, SS und Warnock, DW (2015) Handbuch der klinischen Mikrobiologie, 11. Auflage. Band 1.
5. Kramer, J., G. G. Carter, B. Arret, J. Wilner, W. W. Wright und A. Kirshbaum. 1968. Antibiotikarückstände in Milch, Milchprodukten und tierischen Geweben: Methoden, Berichte und Protokolle. Food and Drug Administration, Washington, DC.
6. Tests und Methoden zur Bestimmung von Antibiotika und antibiotikahaltigen Arzneimitteln, FDA, CFR, 1983 Titel 21, Teil 436, Unterabschnitt D, Washington, DC: US ​​Government Printing Office, Absätze 436, 100-436, 106, S. 242-259, (1. April).
7. Wehr HM und Frank JH, 2004, Standardmethoden für die mikrobiologische Untersuchung von Milchprodukten, 17. Auflage, APHA Inc., Washington, DC

Sicherheitsdatenblatt (SDB)