HiMedia - Baird Parker Agar Base (M043-500G)

Bestimmungsgemäße Verwendung

Empfohlen zur Isolierung und Zählung von koagulasepositiven Staphylokokken aus Lebensmitteln und klinischen Proben.

Zusammensetzung**

Endgültiger pH-Wert (bei 25 °C): 7,0±0,2

**Formel angepasst, standardisiert, um Leistungsparameter zu erfüllen # - Entspricht Rindfleischextrakt

Wegbeschreibung

63,0 g in 950 ml gereinigtem/destilliertem Wasser suspendieren. Zum vollständigen Auflösen des Mediums erhitzen. 15 Minuten bei 15 psi (121 °C) autoklavieren. Auf 50 °C abkühlen lassen und aseptisch 50 ml konzentrierte Eigelbemulsion (FD045) und 3 ml steriles PTe 3,5 % Selektivzusatz (1 ml pro Durchstechflasche) (FD047) oder 50 ml Eigelb-Tel-Emulsion (100 ml pro Durchstechflasche) (FD046) zugeben. Zur Erhöhung der Selektivität kann bei Bedarf der rehydrierte Inhalt einer Durchstechflasche BP S Selektivzusatz (FD069) hinzugefügt werden. Alternativ kann zur Identifizierung von koagulasepositiven Staphylokokken eine Durchstechflasche FPT-Inhibitor (FD195) pro 90 ml Medium anstelle von Eigelb-Tel-Emulsion (100 ml pro Durchstechflasche) (FD046) verwendet werden. Gut mischen und in sterile Petrischalen gießen.

Prinzip und Auslegung

Baird-Parker-Agar wurde von Baird Parker (1,2) auf Basis der Tellurit-Glycin-Formulierung von Zebovitz et al. (3) zur Isolierung und Zählung von Staphylokokken in Lebensmitteln und anderen Materialien entwickelt, da er eine gute Differenzierung koagulasepositiver Stämme ermöglicht. Es wurde eine hohe Korrelation zwischen dem Koagulasetest und dem Auftreten einer klaren Lipolysezone in diesem Medium festgestellt, die auf die Lecithinase der Staphylokokken zurückzuführen ist, welche das Eigelb abbaut. Studien zeigen außerdem, dass nahezu 100 % der koagulasepositiven Staphylokokken Tellurit reduzieren können, was zur Bildung schwarzer Kolonien führt, während dies anderen Staphylokokken nicht immer gelingt. Das Medium erwies sich als weniger hemmend für … Staphylococcus aureus Baird-Parker-Agar ist selektiver als andere Nährmedien und weist gleichzeitig eine höhere Selektivität auf (4, 5, 6). In der Folge wurde die Verwendung von Baird-Parker-Agar offiziell von AOAC International (7) übernommen und wird in der USP für die Durchführung mikrobiologischer Grenzwerttests empfohlen (8). Kürzlich hat auch das ISO-Komitee dieses Medium zur Isolierung und Zählung von Staphylokokken empfohlen (9).

Die Identität von Staphylococcus aureus Auf Baird-Parker-Agar isolierte Bakterien müssen mittels Koagulase-Reaktion bestätigt werden. Baird-Parker-Agar kann auch zur Bestimmung der Koagulaseaktivität durch Zugabe von Fibrinogenplasma (10) verwendet werden. FPT-Inhibitor (FD195), gelöst in 10 ml sterilem destilliertem Wasser, wird zu 90 ml sterilem, geschmolzenem Medium gegeben, das bei 45–50 °C gehalten wird. Auf diesem Medium erscheinen koagulasepositive Kolonien weiß bis grauschwarz, umgeben von einer undurchsichtigen Zone aufgrund der Koagulaseaktivität. Die Inkubation erfolgt innerhalb von 24–48 Stunden bei 35 °C. Die Reduktion von Tellurit ist aufgrund des Fehlens von Eigelbemulsion notwendig. Dies führt zu durchscheinendem Agar und weiß bis grau gefärbten Staphylokokkenkolonien. Für quantitative Ergebnisse werden 20–200 Kolonien ausgewählt und ausgezählt. Staphylococcus aureus Kolonien wie diese auf Koagulasereaktion testen. Bericht Staphylococcus aureus pro Gramm Futter. Smith und Baird-Parker (11) stellten fest, dass die Zugabe von 50 mg/l Sulfamethazin zum Medium das Wachstum und das Schwärmen von Proteus Spezies.

Trypton, HM-Pepton B und Hefeextrakt sind Quellen für Stickstoff, Kohlenstoff, Schwefel und Vitamine. Natriumpyruvat schützt nicht nur geschädigte Zellen und fördert die Regeneration, sondern stimuliert auch … Staphylococcus aureus Wachstum ohne Beeinträchtigung der Selektivität. Lithiumchlorid und Kaliumtellurit hemmen die meisten kontaminierenden Mikroorganismen, außer Staphylococcus aureus . Der Telluritzusatz ist für andere Eigelb-auflösende Stämme als Staphylococcus aureus toxisch. S. aureus und verleiht den Kolonien eine schwarze Farbe.

Glycin und Pyruvat fördern das Wachstum von Staphylokokken . Durch Zugabe von Eigelb färbt sich das Medium gelb und wird undurchsichtig. Das Eigelb dient nicht nur der Anreicherung, sondern unterstützt auch die Identifizierung durch den Nachweis von Lecithinaseaktivität (Eigelbreaktion). Eine klare Zone und grauschwarze Kolonien auf diesem Medium sind diagnostisch für koagulasepositive Staphylokokken. Bei weiterer Inkubation bildet sich um die Kolonien eine undurchsichtige Zone, die auf lipolytische Aktivität zurückzuführen sein kann. Zur Prüfung des Mediums wird das zu untersuchende Material (0,1 ml pro Petrischale mit 90–100 mm Durchmesser) beimpft, bei 37 °C inkubiert und nach 24–26 Stunden abgelesen. Die Kolonien von Staphylococcus aureus Die Kolonien sind schwarz und glänzend mit einem feinen weißen Rand, umgeben von einer klaren Zone. Nach weiteren 24 Stunden Inkubation bei 37 °C wird der Koagulasetest an den Kolonien mit den oben genannten Merkmalen durchgeführt, die sich während dieser Inkubationszeit entwickelt haben. Die Platten sollten am selben Tag der Präparation oder innerhalb von 48 Stunden verwendet werden, um ein Verschwimmen der Präzipitationszonen zu vermeiden. Das Basalmedium ohne Eigelb und Tellurit ist vollkommen stabil. Kolonien einiger kontaminierender Organismen können die Koagulase-Halo-Reaktion verdauen. Andere Bakterien können auf diesem Medium wachsen, jedoch kann der biochemische Test koagulasepositive Staphylokokken von anderen Organismen unterscheiden.

Art der Probe

Klinische Proben: Eiter, Wunden, Lebensmittel- und Milchproben

Probenentnahme und -behandlung

Bei Lebensmittel- und Milchproben sind die in den Richtlinien (12, 13, 14) beschriebenen Verfahren zur Probenentnahme und -verarbeitung anzuwenden. Bei klinischen Proben sind die in den etablierten Richtlinien (15, 16) beschriebenen Verfahren zur Probenhandhabung zu befolgen. Kontaminierte Materialien müssen nach Gebrauch durch Autoklavieren sterilisiert und anschließend entsorgt werden.

Warnung und Vorsichtsmaßnahmen

Zur In-vitro-Diagnostik. Nur für den professionellen Gebrauch. Vor dem Öffnen des Behälters das Etikett lesen. Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz tragen. Bei der Handhabung von Proben und Kulturen die üblichen mikrobiologischen Laborpraktiken beachten. Beim Umgang mit klinischen Proben sind die Standardvorkehrungen gemäß den geltenden Richtlinien zu treffen. Sicherheitshinweise finden Sie in den jeweiligen Sicherheitsdatenblättern.

Einschränkungen

1. Obwohl das Medium zur Erkennung von Koagulase-positiven Proben empfohlen wird Neben Staphylococcus aureus können sich auch andere Bakterien vermehren.
2. Einzelne Organismen unterscheiden sich in ihren Wachstumsansprüchen und können auf dem Nährmedium unterschiedliche Wachstumsmuster aufweisen.
3. Jede Charge des Mediums wurde mit den Standardstämmen getestet; je nach Herkunft des Organismus können geringfügige Abweichungen im Wachstum auftreten.

Leistung und Bewertung

Die Leistungsfähigkeit des Mediums ist zu erwarten, wenn es gemäß den Anweisungen auf dem Etikett innerhalb des Verfallsdatums verwendet und bei der empfohlenen Temperatur gelagert wird.

Qualitätskontrolle

Aussehen Cremefarbenes bis gelbes, homogenes, rieselfähiges Pulver

Gelierung Fest, vergleichbar mit 2,0%igem Agar-Gel.

Farbe und Klarheit des zubereiteten Mediums Basalmedium: Gelbliches, klares bis leicht trübes Gel. Nach Zugabe von Eigelbemulsion und Telluritemulsion: Gelbliches, opakes Gel in Petrischalen.

Reaktion Reaktion einer 6,3 % (w/v) wässrigen Lösung bei 25 °C. pH-Wert: 7,0 ± 0,2

pH 6,80-7,20

Kulturelle Reaktion

Eine kulturelle Reaktion wurde nach einer Inkubation bei 35–37 °C über 24–48 Stunden beobachtet. Die Erholungsrate für das Bakterienwachstum auf Sojabohnen-Casein-Digest-Agar wird mit 100 % angenommen.

Legende: *Entsprechende WDCM-Nummern, **Früher bekannt als Bacillus subtilis Unterart. spizizenii'

Lagerung und Haltbarkeit

Lagern Sie das Produkt in einem dicht verschlossenen Behälter bei 10–30 °C und das zubereitete Medium bei 2–8 °C. Verwenden Sie es vor dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum. Nach dem Öffnen sollte das Produkt trocken und gut verschlossen aufbewahrt werden, um Klumpenbildung aufgrund der hygroskopischen Eigenschaften des Produkts zu vermeiden. Unsachgemäße Lagerung kann zu Klumpenbildung führen. Lagern Sie das Produkt an einem trockenen, gut belüfteten Ort, geschützt vor extremen Temperaturen und Zündquellen. Verschließen Sie den Behälter nach Gebrauch wieder fest. Die beste Produktleistung wird erzielt, wenn das Produkt innerhalb des angegebenen Verfallsdatums verwendet wird.

Entsorgung

Der Anwender muss die sichere Entsorgung gebrauchter oder unbrauchbarer Zubereitungen dieses Produkts durch Autoklavieren und/oder Verbrennen gewährleisten. Bei der Entsorgung infektiöser Materialien sind die etablierten Laborverfahren einzuhalten. Material, das mit klinischen Proben in Kontakt gekommen ist, muss dekontaminiert und gemäß den geltenden Labortechniken entsorgt werden (15, 16).

Referenz

1. Baird-Parker AC, 1962, J. Appl. Bacteriol., 25:12.
2. Baird-Parker AC und Davenport E., 1965, J. Appl. Bacteriol., 28:390.
3. Zebovitz E., Evans JB und Niven CF, 1955, J. Bacteriol., 70:686.
4. Assoc. off. Anal. Chem., 1971, 54:401.
5. Baer, ​​1971, J. Assoc. Off. Anal. Chem., 54:732.
6. Tardio und Baer, ​​1971, J. Assoc. Off. Anal. Chem., 54:728.
7. Horwitz (Hrsg.), 2000, Offizielle Analysemethoden von AOAC International, 17. Auflage, Band I, AOAC International, Gaithersburg, MD.
8. United States Pharmacopoeia-National Formulatory (USP-NF), 2022.
9. Internationale Organisation für Normung (ISO), 1983, Entwurf ISO/DIS 6888.
10. Beckers NJ et al, 1984, Can. J. Microbiol., 30:470.
11. Smith BA und Baird-Parker AC, 1964, J. Appl. Bacteriol., 27:78.
12. Salfinger Y. und Tortorello ML, 2015, Kompendium der Methoden zur mikrobiologischen Untersuchung von Lebensmitteln, 5. Auflage, American Public Health Association, Washington, DC
13. Wehr HM und Frank JH, 2004, Standardmethoden für die mikrobiologische Untersuchung von Milchprodukten, 17. Auflage, APHA Inc., Washington, DC
14. American Public Health Association, Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 1978, 14. Auflage, Washington.
15. Isenberg, HD Handbuch der klinischen mikrobiologischen Verfahren, 2. Auflage.
16. Jorgensen, JH, Pfaller, MA, Carroll, KC, Funke, G., Landry, ML, Richter, SS und Warnock, DW (2015) Handbuch der klinischen Mikrobiologie, 11. Auflage. Band 1.

Sicherheitsdatenblatt (SDB)