HiMedia - Gepuffertes Peptonwasser, granuliert (GM1494I-500G)
HiMedia - Gepuffertes Peptonwasser, granuliert (GM1494I-500G)
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Verwendungszweck
Empfohlen als Voranreicherungsmedium für Enterobacteriaceae-Organismen wie Salmonella- und Cronobacterium-Arten aus Lebens- und Futtermitteln, Wasser, Milch, Milchprodukten und anderen Produkten. Zusammensetzung und Leistungskriterien dieses Mediums entsprechen den Spezifikationen der Normen ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017, ISO 19250:2010, ISO 11133:2014 und ISO A1:2018.
Zusammensetzung**
ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017 (E), ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017, Spezifikation - Gepuffertes Peptonwasser (BPW)
| Zutaten | g/L |
|---|---|
| Enzymatischer Aufschluss von Casein | 10.000 |
| Natriumchlorid | 5.000 |
| Dinatriumhydrogenphosphat, Dodecahydrat, (Na2HPO4.12H2O) | 9.000 |
| Kaliumdihydrogenphosphat (KH2PO4) | 1.500 |
| End-pH-Wert (bei 25 °C) | 7,0±0,2 |
Gepuffertes Peptonwasser, granuliert® GM14941
| Zutaten | g/L |
|---|---|
| Pepton# | 10.000 |
| Natriumchlorid | 5.000 |
| Dinatriumhydrogenphosphat, Dodecahydrat, (Na2HPO4.12H2O) | 9.000 |
| Kaliumdihydrogenphosphat (KH2PO4) | 1.500 |
| End-pH-Wert (bei 25 °C) | 7,0±0,2 |
Die Formel wurde an die Leistungsparameter angepasst und standardisiert.
# Entspricht der enzymatischen Verdauung von Casein
Wegbeschreibung
20,07 g (entsprechend dem Gewicht des dehydrierten Mediums) in 1000 ml gereinigtem/destilliertem Wasser suspendieren. Bei Bedarf erwärmen, um das Medium vollständig aufzulösen. Nach Bedarf portionieren und durch Autoklavieren bei 15 psi (121 °C) für 15 Minuten sterilisieren.
Prinzip und Auslegung
Mikroorganismen, die Umweltstress ausgesetzt sind, können strukturelle oder metabolische Schäden erleiden. Diese Mikroorganismen können sich in selektiven Umgebungen nicht vermehren. Daher müssen diese geschädigten Organismen durch Inkubation in einer geeigneten, nicht-selektiven Umgebung wiederhergestellt werden, um die Schäden zu reparieren. Dieses Medium wird auch von APHA und FDA BAM zur Voranreicherung empfohlen. Salmonellen, Cronobacter Und Listerien (1,2). Edel und Kampelmacher (3) stellten fest, dass subletale Verletzungen bei Salmonellen Dies kann bei vielen Lebensmittelkonservierungsverfahren auftreten. Eine Voranreicherung in gepuffertem Peptonwasser (M14941/GM14941) bei 35 °C über 18–24 Stunden führt zur Reparatur geschädigter Zellen (4). Das Puffersystem verhindert bakterielle Schäden durch pH-Wert-Änderungen im Medium. Das ISO-Komitee hat dieses Voranreicherungsmedium auch für den Nachweis von … empfohlen. Enterobacteriaceae (5), Salmonellen (6,7) Cronobacter (8) und Listerien Arten (9) Arten aus Lebensmitteln, Wasser und anderen Materialien. Es wird auch als Verdünnungsmittel für die Zählung aller Mikroorganismen (10) empfohlen.
Art der Probe
ISO 6579-1:2017/ ISO 6887-1:2017/ ISO 11290-1:2017/ ISO 21528-1:2017/ ISO 22964:2017
Lebensmittelproben, einschließlich Milch und Milchprodukte, Tierfutter, Tierkot, Wasser und Umweltproben aus der Primärproduktionsphase.
Probenentnahme und -behandlung:
Verarbeitung: ISO 6887-1:2017 (10) / ISO 11290-1:2017 (9)
Verdünnungsproben: Vorbereitung der Testproben, der Ausgangssuspension und der Dezimalverdünnungen für die mikrobiologische Untersuchung
Verarbeitung : ISO 6579-1:2017 (6)
Voranreicherung: Die Proben (25 Gramm in 225 ml) werden in gepuffertem Peptonwasser (M14941) vorangereichert und bei 34° C bis 38°C für 18 h ± 2 Stunden inkubiert.
Selektive Anreicherung: 0,1 ml der vorangereicherten Probe werden in 10 ml RVS-Bouillon (M14481) oder MSRV-Agar (M1428) inokuliert und bei 41,5 ± 1 °C für 24 ± 3 Stunden inkubiert. 1 ml der Kultur wird in MKTTn-Bouillon (M14961) inokuliert und bei 37 ± 1 °C für 24 ± 3 Stunden inkubiert.
Isolierung: Die so erhaltene Kultur wird anschließend auf modifiziertem XLD-Agar (M0311) ausplattiert und 24 ± 3 Stunden bei 37 °C ± 1 °C inkubiert. Gleichzeitig erfolgt die Ausplattierung auf einem zweiten Isolationsagar.
Bestätigung: Zur Bestätigung werden biochemische und serologische Tests durchgeführt.
Verarbeitung : ISO 21528-1:2017 (5)
Voranreicherung: Die Proben (10 Gramm in 90 ml) werden in gepuffertem Peptonwasser (M14941) vorangereichert und bei 37 ± 1 °C für 18 h ± 2 Stunden inkubiert.
Isolierung: Die so erhaltene Kultur wird dann auf Violett-Rot-Galle-Glucose (VRBG)-Agar (M1684) ausplattiert und bei 37±1 °C für 24±2 Stunden inkubiert.
Bestätigung: Zur Bestätigung werden biochemische und serologische Tests durchgeführt.
Verarbeitung: ISO 22964:2017 (8)
Voranreicherung: Die Proben (10 Gramm in 90 ml) werden in gepuffertem Peptonwasser (M14941) vorangereichert und bei 34° C bis 38°C für 18 h ± 2 Stunden inkubiert.
Selektive Anreicherung: 0,1 ml der vorangereicherten Probe werden in 10 ml Cronobacter Selective Broth (M17861) inokuliert und bei 41,5 ± 1 °C für 24 ± 2 Stunden inkubiert.
Isolierung : Die so erhaltene Kultur wird dann auf HiCrome® Cronobacter Isolation Agar (CCI Agar) (M2062I) ausplattiert und bei 41,5 ± 1 °C für 24 ± 2 Stunden inkubiert.
Bestätigung: Zur Bestätigung werden biochemische und serologische Tests durchgeführt.
Verarbeitung: ISO 19250:2010(E) (7)
Nichtselektive Voranreicherung: 50 ml BPW (M14941) werden bei Raumtemperatur mit der Probe oder deren Verdünnungen beimpft und (18±2) h bei (36 ±2) °C inkubiert.
Selektive Anreicherung: 0,1 ml der erhaltenen Anreicherungsbouillon werden in ein Röhrchen mit 10 ml RVS-Bouillon (M1448I) überführt und bei 41,5 ± 1 °C für 24 ± 3 Stunden inkubiert. Anschließend werden 1 ml der Kultur in MKTTn-Bouillon (M14961) inokuliert und bei 36 ± 2 °C für 24 ± 3 Stunden inkubiert.
Bestätigung: Die so erhaltene Kultur wird anschließend auf modifiziertem XLD-Agar (M031I) ausplattiert und 24 ± 3 Stunden bei 36 ± 2 °C inkubiert. Gleichzeitig erfolgt die Ausplattierung auf einem zweiten Isolationsagar.
Bestätigung: Zur Bestätigung werden biochemische und serologische Tests durchgeführt.
Warnung und Vorsichtsmaßnahmen
Lesen Sie vor dem Öffnen des Behälters das Etikett. Tragen Sie Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz. Beachten Sie beim Umgang mit Proben und Kulturen die üblichen mikrobiologischen Laborpraktiken. Standardvorkehrungen gemäß den geltenden Richtlinien sind beim Umgang mit Proben zu treffen. Sicherheitshinweise finden Sie in den jeweiligen Sicherheitsdatenblättern.
Einschränkungen:
- Einzelne Organismen unterscheiden sich in ihren Wachstumsbedingungen und können im Medium unterschiedliche Wachstumsmuster aufweisen.
- Jede Charge des Nährmediums wurde auf die im Analysezertifikat (COA) aufgeführten Organismen getestet. Anwendern wird empfohlen, das Medium je nach ihren individuellen Anforderungen auch auf andere als die im COA genannten Mikroorganismen zu validieren.
- Zur Bestätigung müssen weitere Subkultivierung, Isolierung und biochemische Tests durchgeführt werden.
Leistung und Bewertung
Die Leistungsfähigkeit des Mediums ist zu erwarten, wenn es gemäß den Anweisungen auf dem Etikett innerhalb des Verfallsdatums verwendet und bei der empfohlenen Temperatur gelagert wird.
Qualitätskontrolle
Aussehen
Cremefarbenes bis gelbes, homogenes, körniges Medium.
Farbe und Klarheit des zubereiteten Mediums
Hellgelbe, klare Lösung ohne Niederschlag
Reaktion
Reaktion einer 2,0 % (w/v) wässrigen Lösung bei 25 °C. pH-Wert: 7,0 ± 0,2
pH
6,80-7,20
Kulturelle Reaktion
ISO 6887-1:2017
Verdünnung: Die Wiederfindungsrate beträgt ± 30 % der ursprünglichen Keimzahl (ermittelt auf Trypton-Soja-Agar, M290), wenn die Inkubationszeit der beimpften Probe 45 Minuten bis 1 Stunde bei 20–25 °C beträgt. Die Platten werden 18 Stunden ± 2 Stunden bei 37 °C ± 2 °C inkubiert.
| Organismus | Inokulum (KBE) | Erholung |
|---|---|---|
| Escherichia coli ATCC 8739 (00012*) | 50-100 | ±30 % der ursprünglichen Zählung |
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | 50-100 | ±30 % der ursprünglichen Zählung |
| Staphylococcus aureus ATCC 6538 (00032*) | 50-100 | ±30 % der ursprünglichen Zählung |
| Staphylococcus aureus ATCC 25923 (00034*) | 50-100 | ±30 % der ursprünglichen Zählung |
ISO 6887-1:2017
Verdünnung: Die Wiederfindungsrate beträgt ± 30 % der ursprünglichen Keimzahl (ermittelt auf Trypton-Soja-Agar, M290), wenn die Inkubationszeit der beimpften Probe 1 Stunde ± 5 Minuten bei 20 ± 2 °C beträgt. Die Platten werden 18 Stunden ± 2 Stunden bei 37 ± 2 °C inkubiert.
Wiederherstellung
| Organismus | Inokulum (KBE) | Erholung |
|---|---|---|
| Listeria monocytogenes ATCC 13932 (00021*) | 50-100 | ±30 % der ursprünglichen Zählung |
| Listeria monocytogenes ATCC 35152 (00109*) | 50-100 | ±30 % der ursprünglichen Zählung |
ISO 6579-1:2017 und ISO 21528-1:2017
Produktivität
Kulturelle Merkmale, die nach einer Inkubation bei 34°C bis 38°C für 18 h ± 2 Stunden beobachtet wurden.
| Organismus | Inokulum (KBE) | Wachstum |
|---|---|---|
| Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*) | 50-100 | gut-üppig |
| Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) | 50-100 | gut-üppig |
| Escherichia coli ATCC 8739 (00012*) | 50-100 | gut-üppig |
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | 50-100 | gut-üppig |
ISO 22964:2017
Produktivität
Kulturelle Merkmale, die nach einer Inkubation bei 34°C bis 38°C für 18 h ± 2 Stunden beobachtet wurden.
| Organismus | Inokulum (KBE) | Wachstum |
|---|---|---|
| Cronobacter sakazakii ATCC 29544 (00214*) | 50-100 | gut-üppig |
| Cronobacter muytjensii ATCC 51329 (00213*) | 50-100 | gut-üppig |
ISO 19250:2010 (E)
Produktivität
Kulturelle Merkmale, die nach einer Inkubation bei 36 ± 2 °C für 24 ± 3 Stunden beobachtet wurden
| Organismus | Inokulum (KBE) | Wachstum |
|---|---|---|
| Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) | 50-100 | gut-üppig |
Legende: * Zugehörige WDCM-Nummern
Lagerung und Haltbarkeit
Lagern Sie das Produkt in einem dicht verschlossenen Behälter bei 10–30 °C und das zubereitete Medium bei 20–30 °C. Verwenden Sie es vor dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum. Nach dem Öffnen sollte das Produkt trocken und gut verschlossen aufbewahrt werden, um Klumpenbildung aufgrund der hygroskopischen Eigenschaften des Produkts zu vermeiden. Unsachgemäße Lagerung kann zu Klumpenbildung führen. Lagern Sie das Produkt an einem trockenen, gut belüfteten Ort, geschützt vor extremen Temperaturen und Zündquellen. Verschließen Sie den Behälter nach Gebrauch wieder fest. Die beste Produktleistung wird erzielt, wenn das Produkt innerhalb des angegebenen Verfallsdatums verwendet wird.
Entsorgung
Der Anwender muss die sichere Entsorgung gebrauchter oder unbrauchbarer Zubereitungen dieses Produkts durch Autoklavieren und/oder Verbrennen gewährleisten. Bei der Entsorgung infektiöser Materialien sind die etablierten Laborverfahren einzuhalten. Material, das mit der Probe in Kontakt gekommen ist, muss dekontaminiert und gemäß den geltenden Labortechniken entsorgt werden (12,13).
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