Himedia - Dextrose-Agar (M084-500G).
Himedia - Dextrose-Agar (M084-500G).
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Zur Kultivierung einer Vielzahl von Mikroorganismen.
Bestimmungsgemäße Verwendung
Empfohlen für die Kultivierung einer Vielzahl von Mikroorganismen.
Zusammensetzung**
| Zutaten | g/L |
|---|---|
| Tryptose | 10.000 |
| HM-Pepton B | 3.000 |
| Dextrose (Glucose) | 10.000 |
| Natriumchlorid | 5.000 |
| Agar | 15.000 |
| End-pH-Wert (bei 25 °C) | 7,3±0,2 |
Die Formel wurde an die Leistungsparameter angepasst und standardisiert.
Wegbeschreibung
43,0 g in 1000 ml gereinigtem/destilliertem Wasser suspendieren. Zum vollständigen Auflösen erhitzen. 15 Minuten bei 15 psi (121 °C) autoklavieren. Auf 45–50 °C abkühlen lassen. Falls gewünscht, kann Blutagar durch Zugabe von 5 % (v/v) sterilem, defibriniertem Schafblut zu sterilem Dextrose-Agar hergestellt werden. Gut mischen und in sterile Petrischalen füllen.
Prinzip und Auslegung
Dextrose in Kulturmedien dient als Energiequelle. Für die Isolierung einer Vielzahl anspruchsvoller Organismen wird ein Basalmedium mit 0,5–1,0 % Dextrose, ergänzt mit defibriniertem Blut, empfohlen (1). Dextrose-Agar, empfohlen von der APHA (2), enthält 1,0 % Dextrose und ermöglicht daher ein frühes und üppiges Wachstum verschiedener Organismen, auch älterer Kulturen. Die Lag-Phase ist auf diesem Medium vergleichsweise verkürzt. Aufgrund der hohen Dextrosekonzentration ist das Medium jedoch nicht zur Untersuchung des Hämolyseverhaltens von Organismen geeignet, da Dextrose die Hämolysereaktion hemmt.
Dextrose-Agar enthält eine hohe Konzentration an Dextrose als Energiequelle für das schnelle Wachstum von Mikroorganismen. Aufgrund des hohen Kohlenhydratgehalts ist dieses Medium jedoch für die Untersuchung der Hämolyse weniger geeignet. HM-Pepton B und Tryptose dienen als Quellen für Stickstoffverbindungen, Schwefel, Kohlenstoff, Vitamine und Mineralstoffe. Das osmotische Gleichgewicht des Mediums wird durch Natriumchlorid aufrechterhalten.
Art der Probe
Klinische Proben – Stuhl, Abszessproben usw.; Lebensmittel- und Milchprodukte; Wasserproben
Probenentnahme und -behandlung:
Bei klinischen Proben sind die für den Umgang mit Proben geeigneten Techniken gemäß den festgelegten Richtlinien (3,4) zu befolgen.
Bei Lebensmittel- und Milchproben sind die in den Richtlinien (5,6,7) beschriebenen geeigneten Verfahren zur Probenahme und -verarbeitung zu beachten.
Bei Wasserproben sind die für die Probenahme und -verarbeitung geeigneten Verfahren gemäß den Richtlinien und lokalen Standards zu befolgen (8).
Kontaminierte Materialien müssen nach Gebrauch durch Autoklavieren sterilisiert werden, bevor sie entsorgt werden können.
Warnung und Vorsichtsmaßnahmen:
Zur In-vitro-Diagnostik. Nur für den professionellen Gebrauch. Lesen Sie vor dem Öffnen des Behälters das Etikett. Tragen Sie Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz. Beachten Sie beim Umgang mit Proben und Kulturen die üblichen mikrobiologischen Laborpraktiken. Beim Umgang mit klinischen Proben sind die Standardvorkehrungen gemäß den geltenden Richtlinien zu treffen. Sicherheitshinweise finden Sie in den jeweiligen Sicherheitsdatenblättern.
Einschränkungen:
- Einzelne Organismen unterscheiden sich in ihren Wachstumsbedingungen und können auf dem Nährmedium unterschiedliche Wachstumsmuster aufweisen.
- Jede Charge des Nährmediums wurde auf die im Analysezertifikat (COA) aufgeführten Organismen getestet. Anwendern wird empfohlen, das Medium je nach ihren individuellen Anforderungen auch auf andere als die im COA genannten Mikroorganismen zu validieren.
- Zur weiteren Identifizierung müssen zusätzliche biochemische und serologische Tests durchgeführt werden.
Leistung und Bewertung
Die Leistungsfähigkeit des Mediums ist zu erwarten, wenn es gemäß den Anweisungen auf dem Etikett innerhalb des Verfallsdatums verwendet und bei der empfohlenen Temperatur gelagert wird.
Qualitätskontrolle
Aussehen Cremefarbenes bis gelbes, homogenes, rieselfähiges Pulver
Gelierung Fest, vergleichbar mit 1,5%igem Agar-Gel
Farbe und Klarheit des zubereiteten Mediums Basalmedium: Hellgelb. Nach Zugabe von 5 % (v/v) sterilem, defibriniertem Blut: Kirschrot gefärbt. Basalmedium: Klares bis leicht opaleszentes Gel; nach Zugabe: Opakes Gel in Petrischalen.
Reaktion Reaktion einer 4,3% (w/v) wässrigen Lösung bei 25 °C. pH-Wert: 7,3 ± 0,2
pH 7.10-7.50
Kulturelle Reaktion
Kulturelle Merkmale, die nach einer Inkubation bei 35-37°C über 18-24 Stunden beobachtet wurden.
| Organismus | Inokulum (KBE) | Wachstum | Erholung | Wachstum mit Blut | Genesung mit Blut |
|---|---|---|---|---|---|
| Bordetella pertussis ATCC 8467 | 50-100 | Gut | 50-70% | üppig | >=70% |
| Neisseria meningitidis ATCC 13090 | 50-100 | Gut | 50-70% | üppig | >=70% |
| Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424 | 50-100 | Gut | 50-70% | üppig | >=70% |
| Streptococcus pyogenes ATCC 19615 | 50-100 | Gut | 50-70% | üppig | >=70% |
| Clostridium perfringens ATCC 12919 | 50-100 | mittelmäßig-gut | 40-50% | üppig | >=70% |
Lagerung und Haltbarkeit
Lagern Sie das Produkt in einem dicht verschlossenen Behälter bei 10–30 °C und das zubereitete Medium bei 20–30 °C. Verwenden Sie das Produkt vor dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum. Nach dem Öffnen sollte das Produkt trocken und gut verschlossen aufbewahrt werden, um Klumpenbildung aufgrund der hygroskopischen Eigenschaften des Produkts zu vermeiden. Unsachgemäße Lagerung kann zu Klumpenbildung führen. Lagern Sie das Produkt an einem trockenen, gut belüfteten Ort, geschützt vor extremen Temperaturen und Zündquellen. Verschließen Sie den Behälter nach Gebrauch wieder fest. Die beste Produktleistung wird erzielt, wenn das Produkt innerhalb des angegebenen Verfallsdatums verwendet wird.
Entsorgung
Der Anwender muss die sichere Entsorgung gebrauchter oder unbrauchbarer Zubereitungen dieses Produkts durch Autoklavieren und/oder Verbrennen gewährleisten. Bei der Entsorgung infektiöser Materialien sind die etablierten Laborverfahren einzuhalten. Material, das mit der Probe in Kontakt gekommen ist, muss dekontaminiert und gemäß den geltenden Labortechniken entsorgt werden (3,4).
Referenz
- Norton, 1932, J. Lab. Klin. Med., 17:585.
- Salfinger Y. und Tortorello ML, 2015, Kompendium der Methoden zur mikrobiologischen Untersuchung von Lebensmitteln, 5. Auflage, American Public Health Association, Washington, DC
- Isenberg, HD Handbuch der klinischen mikrobiologischen Verfahren, 2. Auflage.
- Jorgensen, JH, Pfaller, MA, Carroll, KC, Funke, G., Landry, ML, Richter, SS und Warnock, DW (2015) Handbuch der klinischen Mikrobiologie, 11. Auflage. Band 1.
- Amerikanische Vereinigung für öffentliche Gesundheit, Standardmethoden zur Untersuchung von Milchprodukten, 1978, 14. Auflage, Washington DC
- Wehr HM und Frank JH, 2004, Standardmethoden für die mikrobiologische Untersuchung von Milchprodukten, 17. Auflage, APHA Inc., Washington, DC
- Lipps WC, Braun-Howland EB, Baxter TE, Hrsg. Standardmethoden zur Untersuchung von Wasser und Abwasser, 24. Aufl. Washington DC: APHA Press; 2023.
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