Zur Kultivierung und Isolierung anaerober Bakterien und zur Prüfung ihrer Empfindlichkeit gegenüber Antibiotika mit Ausnahme von Sulfonamiden.
Bestimmungsgemäße Verwendung
Empfohlen für die Kultivierung und Isolierung anaerober Bakterien und zur Prüfung ihrer Empfindlichkeit gegenüber Antibiotika mit Ausnahme von Sulfonamiden.
Zusammensetzung**
| Zutaten |
Gramm / Liter |
| Pepton |
10.000 |
| Sojapepton |
3.000 |
| Proteose-Pepton |
10.000 |
| Verdautes Serum |
13.500 |
| Hefeextrakt |
5.000 |
| HM Pepton B # |
2.200 |
| HL-Extrakt ## |
1.200 |
| Dextrose (Glucose) |
3.000 |
| Kaliumdihydrogenphosphat |
2.500 |
| Natriumchlorid |
3.000 |
| Stärke, löslich |
5.000 |
| L-Cysteinhydrochlorid |
0,300 |
| Natriumthioglykolat |
0,300 |
Endgültiger pH-Wert (bei 25 °C): 7,3±0,1
Die Formel wurde an die Leistungsparameter angepasst und standardisiert.
# Entspricht Rindfleischextrakt
## Entspricht Leberextrakt
Wegbeschreibung
59,0 g in 1000 ml gereinigtem/destilliertem Wasser suspendieren. Bei Bedarf erwärmen, um das Medium vollständig aufzulösen. In Röhrchen oder Kolben abfüllen oder nach Bedarf. Durch Autoklavieren bei 10 psi (115 °C) für 15 Minuten sterilisieren.
Prinzip und Auslegung
Das Gifu-Anaerobiermedium (GAM-Bouillon) ist ein flüssiges Medium für anaerobe Bakterien. Da es verdautes Serum mit Hämin enthält, eignet es sich zur Kultivierung anaerober Organismen wie Streptokokken, Pneumokokken und Meningokokken. Dieses Medium ist auch für Blutkulturen geeignet (1). Anaerobe Organismen benötigen reduzierende Bedingungen und müssen sauerstofffrei sein. Streng anaerobe Bakterien gewinnen ihre Energie und Zwischenprodukte durch Oxidation mit anderen Wasserstoffakzeptoren als Sauerstoff. Durch Vorreduktion des Mediums mittels Abkochen lässt sich der Sauerstoff entfernen (2). Natriumthioglykolat und L-Cystein werden als Reduktionsmittel zugesetzt, um eine ausreichende Anaerobiose zu gewährleisten. Anaerobe Bakterien unterscheiden sich in ihrer Sauerstoffempfindlichkeit und ihren Nährstoffansprüchen (3).
Pepton, Sojapepton, Proteosepepton, HM-Pepton B, HL-Extrakt und Hefeextrakt liefern Stickstoff, Kohlenstoffverbindungen, langkettige Aminosäuren, Vitamin-B-Komplex, Mineralstoffe und andere Spurenelemente, die für das Wachstum anaerober Bakterien notwendig sind. Stärke absorbiert die entstehenden toxischen Stoffwechselprodukte (4). Hämin dient als essenzieller Wachstumsfaktor und Natriumchlorid erhält das osmotische Gleichgewicht aufrecht (5).
Art der Probe
Isolierter Mikroorganismus
Probenentnahme und -behandlung
Bei der Probenentnahme aus isolierten Mikroorganismen sind die in den etablierten Richtlinien (2,6) beschriebenen geeigneten Verfahren zur Probenhandhabung zu befolgen. Kontaminierte Materialien müssen nach Gebrauch durch Autoklavieren sterilisiert und anschließend entsorgt werden.
Warnung und Vorsichtsmaßnahmen
Lesen Sie vor dem Öffnen des Behälters das Etikett. Tragen Sie Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz. Beachten Sie beim Umgang mit Proben und Kulturen die üblichen mikrobiologischen Laborpraktiken. Standardvorkehrungen gemäß den geltenden Richtlinien sind beim Umgang mit Proben zu treffen. Sicherheitshinweise finden Sie in den jeweiligen Sicherheitsdatenblättern.
Einschränkungen
- Bei einigen Organismen kann es aufgrund von Nährstoffschwankungen zu Wachstumsstörungen kommen.
- Zur weiteren Identifizierung müssen zusätzliche biochemische und serologische Tests durchgeführt werden.
Leistung und Bewertung
Die Leistungsfähigkeit des Mediums ist zu erwarten, wenn es gemäß den Anweisungen auf dem Etikett innerhalb des Verfallsdatums verwendet und bei der empfohlenen Temperatur gelagert wird.
Qualitätskontrolle
Aussehen: Hellgelbes bis bräunlich-gelbes, homogenes, rieselfähiges Pulver
Farbe und Klarheit des vorbereiteten Mediums: Im Röhrchen bildet sich eine bernsteinfarbene, klare Lösung.
Reaktion: Reaktion einer 5,9 % (w/v) wässrigen Lösung bei 25 °C. pH-Wert: 7,3 ± 0,1
Kulturelle Reaktion: Kulturelle Merkmale, die in einer anaeroben Atmosphäre nach einer Inkubation bei 35 - 37 °C über 48 - 72 Stunden beobachtet wurden.
Legende: (*) Zugehörige WDCM-Nummern.
Lagerung und Haltbarkeit
Lagern Sie das Produkt in einem dicht verschlossenen Behälter bei 10–30 °C und das zubereitete Medium bei 15–25 °C. Verwenden Sie das Produkt vor dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum. Nach dem Öffnen sollte das Produkt trocken und gut verschlossen aufbewahrt werden, um Klumpenbildung aufgrund der hygroskopischen Eigenschaften des Produkts zu vermeiden. Unsachgemäße Lagerung kann zu Klumpenbildung führen. Lagern Sie das Produkt an einem trockenen, gut belüfteten Ort, geschützt vor extremen Temperaturen und Zündquellen. Verschließen Sie den Behälter nach Gebrauch wieder fest. Die beste Produktleistung wird erzielt, wenn das Produkt innerhalb des angegebenen Verfallsdatums verwendet wird.
Entsorgung
Der Anwender muss die sichere Entsorgung gebrauchter oder unbrauchbarer Zubereitungen dieses Produkts durch Autoklavieren und/oder Verbrennen gewährleisten. Bei der Entsorgung infektiöser Materialien sind die etablierten Laborverfahren einzuhalten. Material, das mit klinischen Proben in Kontakt gekommen ist, muss dekontaminiert und gemäß den geltenden Labortechniken entsorgt werden (2,6).
Referenz
- Nissui-Handbuch, Mikrobiologische Produkte, Nissui Pharmaceutical Co., 1983.
- Isenberg, HD Handbuch der klinischen mikrobiologischen Verfahren. 2. Auflage.
- Collee JG, Fraser AG, Marminon BP, Simmons A.,(Hrsg.), 1996, Mackie and McCartney. Praktische medizinische Mikrobiologie, 14. Auflage, Churchill Livingstone.
- Ajello. GW, Geely JC, Hayes PSet al., 1984, J. clin Microbiol., 20:55-8.
- Gibbons RJ und MacDonald JB, 1960, J. Bacteriol., 80:164-170
- Jorgensen, JH, Pfaller, MA, Carroll, KC, Funke, G., Landry, ML, Richter, SS und Warnock, DW (2015) Handbuch der klinischen Mikrobiologie, 11. Auflage. Band 1.
Sicherheitsdatenblatt (SDB)
