Zur Zählung heterotropher Mikroorganismen aus Wasserproben mittels Membranfiltertechnik.
Für die Zählung heterotropher Mikroorganismen aus Wasserproben mittels Membranfiltrationstechnik wird M-(HPC) Heterotrophic Plate Count Agar Base empfohlen.
Zusammensetzung
| Zutaten |
Gramm/Liter |
| Peptischer Verdauungstrakt von tierischem Gewebe |
20.000 |
| Gelatine |
25.000 |
| Agar |
15.000 |
Endgültiger pH-Wert (bei 25 °C): 7,1±0,2
Die Formel wurde angepasst und standardisiert, um den Leistungsparametern gerecht zu werden.
Wegbeschreibung
60,0 g in 1000 ml destilliertem Wasser mit 10 ml Glycerin suspendieren. Zum vollständigen Auflösen erhitzen. 5 Minuten bei 15 psi (121 °C) autoklavieren. Gut mischen und nach Bedarf portionieren.
Prinzip und Auslegung
Heterotrophe Organismen, darunter Bakterien, Hefen und Schimmelpilze, benötigen für ihr Wachstum eine externe Quelle organischen Kohlenstoffs. Die heterotrophe Keimzahlbestimmung (HPC), früher auch als Standard-Keimzahlbestimmung bekannt, ist ein Verfahren zur Schätzung der Anzahl lebender heterotropher Bakterien in Wasser und zur Messung von Veränderungen während der Wasseraufbereitung und -verteilung oder in Schwimmbädern. Die heterotrophe Keimzahlbestimmungsmethode wird in vielen Varianten angewendet und ist weit verbreitet zur Messung der Population heterotropher Mikroorganismen in Trinkwasser und anderen Medien. M-(HPC) Heterotrophe Keimzahlbestimmungs-Agarbasis mit Glycerinzusatz wird für den Nachweis heterotropher Organismen in Trinkwasser, Schwimmbadwasser und anderen Gewässern empfohlen (1, 2).
Es werden drei verschiedene Methoden zur Bestimmung der heterotrophen Keimzahl beschrieben: die Ausgussmethode, die Ausstrichmethode und die Membranfiltrationsmethode. Für die Membranfiltrationstechnik wird M-(HPC) Heterotrophic Plate Count Agar Base verwendet. M-(HPC) Heterotrophic Plate Count Bouillon Base kann ebenfalls zur Bestimmung der heterotrophen Keimzahl mittels Membranfiltration eingesetzt werden. Sterile Wattepads werden mit dem Nährmedium getränkt. Anschließend werden Membranfilter auf diese getränkten Wattepads oder die Agaroberfläche gelegt und inkubiert.
Peptische Verdauungsprodukte tierischen Gewebes dienen als Nährstoffquelle für Organismen, die nicht besonders anspruchsvoll sind. Gelatine wird von Mikroorganismen über einen proteolytischen Mechanismus verwertet. Die Zugabe von Glycerin zum Basalmedium liefert Kohlenstoff und Energie.
Qualitätskontrolle
Aussehen: Cremefarbenes bis gelbes, homogenes, rieselfähiges Pulver
Gelierung: Fest, vergleichbar mit 1,5%igem Agar-Gel und 2,5%igem Gelatine-Gel
Farbe und Klarheit des vorbereiteten Mediums: In Petrischalen bildet sich ein hellgelbes, klares bis leicht trübes Gel.
Reaktion: Reaktion einer 6,0 % (w/v) wässrigen Lösung bei 25 °C. pH-Wert: 7,1 ± 0,2
pH-Wert: 6,90-7,30
Kulturelle Reaktion: M1123: Kulturelle Merkmale, die nach einer Inkubation bei 35-37°C für 18-24 Stunden beobachtet wurden.
Lagerung und Haltbarkeit
In einem dicht verschlossenen Behälter unter 30 °C lagern, das zubereitete Medium bei 2–8 °C aufbewahren. Vor Ablauf des auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatums verwenden.
Referenz
- Taylor RH und Geldreich EE, 1979, J. Am. Water works Assoc. 71:402.
- Eaton AD, Clesceri LS und Greenberg A W. (Hrsg.), 2005, Standardmethoden zur Untersuchung von Wasser und Abwasser, 21. Auflage, APHA, Washington, DC
Sicherheitsdatenblatt (SDB)
