Verwendungszweck
MacConkey-Agar dient der Isolierung, Identifizierung und Zählung von laktosefermentierenden und laktosenichtfermentierenden Darmbakterien. Er wird vom BIS-Komitee gemäß der Spezifikation IS:5887 (Teil I und Teil II) -1976 empfohlen.
Zusammensetzung
| Zutaten |
Gramm / Liter |
| Pepton |
20.000 |
| Laktose |
10.000 |
| Gallensalze |
5.000 |
| Natriumchlorid |
5.000 |
| Neutralrot |
0,070 |
| Agar |
15.000 |
| End-pH-Wert (bei 25 °C) |
7,5 ± 0,2 |
Die Formel wurde an die Leistungsparameter angepasst und standardisiert.
Wegbeschreibung
55,07 g in 1000 ml destilliertem Wasser suspendieren. Unter leichtem Rühren zum Sieden erhitzen, bis sich das Medium vollständig aufgelöst hat. 15 Minuten bei 15 psi (121 °C) autoklavieren. Überhitzung vermeiden. Auf 45–50 °C abkühlen lassen und in sterile Petrischalen füllen. Die Oberfläche des Mediums sollte beim Beimpfen trocken sein.
Prinzip und Auslegung
MacConkey-Agar wird zur Isolierung, Identifizierung und Zählung von Staphylococcus aureus und fäkalen Streptokokken.(1) MacConkey-Agar ist das erste selektive und differenzielle Medium zur Kultivierung von Darmbakterien aus verschiedenen klinischen Proben (2,3). In der Folge wurden MacConkey-Agar und -Bouillon für die mikrobiologische Untersuchung von Lebensmitteln (4) und für die direkte Beimpfung von Wasserproben zur Bestimmung der Coliformenzahl empfohlen (5). Diese Medien sind auch in den Standardmethoden zur Untersuchung von Milch und Milchprodukten (6) sowie von pharmazeutischen Präparaten (7) anerkannt.
Pepton liefert stickstoff- und kohlenstoffhaltige Verbindungen, langkettige Aminosäuren, Vitamine und andere essentielle Nährstoffe für das Wachstum. Das Originalmedium enthält Proteine, Gallensalze, Natriumchlorid und zwei Farbstoffe. Die selektive Wirkung dieses Mediums beruht auf Kristallviolett und Gallensalzen, die das Wachstum der meisten grampositiven Bakterien hemmen. Gramnegative Bakterien wachsen in der Regel gut auf diesem Medium und unterscheiden sich durch ihre Fähigkeit, Laktose zu fermentieren. Laktosefermentierende Stämme wachsen rot oder rosa und können von einer Zone aus ausgefällter Galle umgeben sein. Die rote Farbe entsteht durch die Säurebildung aus Laktose, die Absorption von Neutralrot und den anschließenden Farbumschlag des Farbstoffs, wenn der pH-Wert des Mediums unter 6,8 sinkt. Laktosenichtfermentierende Stämme, wie z. B. Shigella Und Salmonellen Sie sind farblos und transparent und verändern typischerweise nicht das Aussehen des Mediums. Yersinia enterocolitica Sie können nach Inkubation bei Raumtemperatur als kleine, nicht laktosefermentierende Kolonien erscheinen. Auch Bakterien, die Lebensmittelvergiftungen verursachen, werden auf MacConkey-Agar isoliert. Staphylococcus aureus und fäkale Streptokokken.
Art der Probe
Lebensmittel- und Milchproben; Wasserproben
Probenentnahme und -behandlung
Bei Lebensmittel- und Milchproben sind die in den Richtlinien (4, 6, 10) beschriebenen Verfahren zur Probenahme und -verarbeitung anzuwenden. Bei Wasserproben sind die in den Richtlinien und lokalen Normen (5) beschriebenen Verfahren zur Probenahme und -verarbeitung anzuwenden. Kontaminierte Materialien müssen nach Gebrauch vor der Entsorgung im Autoklaven sterilisiert werden.
Warnhinweise und Vorsichtsmaßnahmen:
Nur zur In-vitro-Diagnostik. Vor dem Öffnen des Behälters die Gebrauchsanweisung lesen. Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz tragen. Bei der Probenhandhabung und -kultur die üblichen mikrobiologischen Laborpraktiken beachten. Beim Umgang mit klinischen Proben sind die Standardvorkehrungen gemäß den geltenden Richtlinien zu treffen. Sicherheitshinweise finden Sie in den jeweiligen Sicherheitsdatenblättern.
Leistung und Bewertung
Die Leistungsfähigkeit des Mediums ist zu erwarten, wenn es gemäß den Anweisungen auf dem Etikett innerhalb des Verfallsdatums verwendet und bei der empfohlenen Temperatur gelagert wird.
Qualitätskontrolle
Aussehen Hellgelbes bis rosa homogenes rieselfähiges Pulver
Gelierung Fest, vergleichbar mit 1,5%igem Agar-Gel.
Farbe und Klarheit des zubereiteten Mediums In Petrischalen bilden sich hellrote, klare bis leicht trübe Gele.
Reaktion Reaktion einer 5,5 % (w/v) wässrigen Lösung bei 25 °C. pH-Wert: 7,5 ± 0,2
pH 7.30-7.70
Kulturelle Reaktion
Kulturelle Merkmale, die nach einer Inkubation bei 35 - 37 °C über 18 - 24 Stunden beobachtet wurden.
| Organismus |
Inokulum (KBE) |
Wachstum |
Erholung |
Farbe der Kolonie |
|
Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) |
50-100 |
üppig |
>=50% |
rosa bis rot mit Gallenausfällung |
| # Klebsiella aerogenes ATCC 13048 (00175*) |
50-100 |
üppig |
>=50% |
blassrosa bis rot |
|
Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) |
50-100 |
mittelmäßig bis gut |
30-40% |
blassrosa bis rot |
|
Proteus vulgaris ATCC 13315 |
50-100 |
üppig |
>=50% |
farblos |
|
Salmonella Paratyphi A ATCC 9150 |
50-100 |
üppig |
>=50% |
farblos |
|
Shigella flexneri ATCC 12022 (00126*) |
50-100 |
mittelmäßig bis gut |
30-40% |
farblos |
|
Salmonella Paratyphi B ATCC 8759 |
50-100 |
üppig |
>=50% |
farblos |
|
Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*) |
50-100 |
üppig |
>=50% |
farblos |
|
Salmonella Typhi ATCC 6539 |
50-100 |
üppig |
>=50% |
rosa bis rot |
|
Staphylococcus aureus Unterart. aureus ATCC 25923 (00034*) |
>=10 3
|
Hemmung |
0 % |
|
Legende: *Zugehörige WDCM-Nummern. # Früher bekannt als Enterobacter aerogenes
Lagerung und Haltbarkeit
Lagern Sie das Produkt in einem dicht verschlossenen Behälter bei 10–30 °C und das zubereitete Medium bei 20–30 °C. Verwenden Sie das Produkt vor dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum. Nach dem Öffnen sollte das Produkt trocken und gut verschlossen aufbewahrt werden, um Klumpenbildung aufgrund der hygroskopischen Eigenschaften des Produkts zu vermeiden. Unsachgemäße Lagerung kann zu Klumpenbildung führen. Lagern Sie das Produkt an einem trockenen, gut belüfteten Ort, geschützt vor extremen Temperaturen und Zündquellen. Verschließen Sie den Behälter nach Gebrauch fest. Verwenden Sie das Produkt vor dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum. Die beste Produktleistung wird erzielt, wenn das Produkt innerhalb des angegebenen Verfallsdatums verwendet wird.
Bitte beachten Sie den Haftungsausschluss auf der Rückseite.
Entsorgung
Der Anwender muss die sichere Entsorgung gebrauchter oder unbrauchbarer Zubereitungen dieses Produkts durch Autoklavieren und/oder Verbrennen gewährleisten. Bei der Entsorgung infektiöser Materialien sind die etablierten Laborverfahren einzuhalten. Material, das mit klinischen Proben in Kontakt gekommen ist, muss dekontaminiert und gemäß den geltenden Labortechniken entsorgt werden (8,9).
Referenz
- Bureau of Indian Standards IS :5887 (Teil II)- 1976, reaffirm 1986.
- MacConkey, 1905, J. Hyg., 5:333.
- MacConkey, 1900, The Lancet, ii:20.
- Speck M. (Hrsg.), 1985, Kompendium der Methoden zur mikrobiologischen Untersuchung von Lebensmitteln, 2. Aufl., APHA, Washington, DC
- Baird RB, Eaton AD und Rice EW (Hrsg.), 2015, Standardmethoden zur Untersuchung von Wasser und Abwasser, 23. Auflage, APHA, Washington, DC
- Wehr HM und Frank JH, 2004, Standardmethoden für die mikrobiologische Untersuchung von Milchprodukten, 17. Auflage, APHA Inc., Washington, DC
- United States Pharmacopoeia XXI und National Formulary, 16. Auflage, 1985, United States Pharmacopoeial Convention, Inc., Washington, DC
- Isenberg, HD Handbuch der klinischen mikrobiologischen Verfahren. 2. Auflage.
- Jorgensen, JH, Pfaller, MA, Carroll, KC, Funke, G., Landry, ML, Richter, SS und Warnock, DW (2015)
- Salfinger Y. und Tortorello ML (Hrsg.), 2015, Kompendium der Methoden zur mikrobiologischen Untersuchung von Lebensmitteln, 5. Auflage, American Public Health Association, Washington, DC
