Ein universell einsetzbares Nährmedium zur Kultivierung von weniger anspruchsvollen Mikroorganismen, das mit Blut oder anderen biologischen Flüssigkeiten angereichert werden kann.
Verwendungszweck
Nähragar dient als universelles Medium für die Kultivierung von weniger anspruchsvollen Mikroorganismen und kann mit Blut oder anderen biologischen Flüssigkeiten angereichert werden.
Zusammensetzung**
| Zutaten |
g/L |
| Pepton |
5.000 |
| Natriumchlorid |
5.000 |
| HM Pepton B# |
1.500 |
| Hefeextrakt |
1.500 |
| Agar |
15.000 |
| End-pH-Wert (bei 25 °C) |
7,4 ± 0,2 |
Die Formel wurde an die Leistungsparameter angepasst und standardisiert.
# - Entspricht Rindfleischextrakt
Wegbeschreibung
28,0 g in 1000 ml gereinigtem/destilliertem Wasser suspendieren. Zum vollständigen Auflösen des Mediums erhitzen. 15 Minuten bei 15 psi (121 °C) autoklavieren. Auf 45–50 °C abkühlen lassen. Bei Bedarf kann das Medium mit 5–10 % Blut oder anderen biologischen Flüssigkeiten angereichert werden. Gut mischen und in sterile Petrischalen füllen.
Prinzip und Auslegung
Nährmedien sind Basiskulturmedien zur Erhaltung von Mikroorganismen und zur Kultivierung anspruchsvoller Organismen durch Anreicherung mit Serum oder Blut. Sie werden auch zur Reinheitsprüfung vor biochemischen oder serologischen Tests eingesetzt (1,2). Nähragar eignet sich ideal für Demonstrations- und Lehrzwecke, da hier ein längeres Überleben von Kulturen bei Raumtemperatur ohne die Gefahr des Überwachsens, wie es bei nährstoffreicheren Substraten auftreten kann, erforderlich ist. Diese relativ einfache Zusammensetzung hat sich bewährt und wird weiterhin in der mikrobiologischen Untersuchung verschiedenster Materialien verwendet und ist auch in Standardmethoden empfohlen. Es ist eines der mehreren nichtselektiven Medien, die für die routinemäßige Kultivierung von Mikroorganismen geeignet sind (3,4). Es kann zur Kultivierung und Zählung von Bakterien verwendet werden, die nicht besonders anspruchsvoll sind. Die Zugabe verschiedener biologischer Flüssigkeiten wie Pferde- oder Schafblut, Serum, Eigelb usw. ermöglicht die Kultivierung verwandter anspruchsvoller Organismen. Pepton, HM-Pepton B und Hefeextrakt liefern die notwendigen Stickstoffverbindungen, Kohlenstoff, Vitamine sowie einige Spurenelemente, die für das Bakterienwachstum erforderlich sind. Natriumchlorid erhält das osmotische Gleichgewicht des Mediums aufrecht.
Art der Probe
Klinische Proben – Stuhl, Urin; Lebensmittel- und Milchprodukte; Wasserproben
Probenentnahme und -behandlung:
- Bei klinischen Proben sind die für den Umgang mit Proben geeigneten Techniken gemäß den festgelegten Richtlinien (5,6) zu befolgen.
- Bei Lebensmittel- und Milchproben sind die in den Richtlinien (3,4,7) beschriebenen geeigneten Techniken zur Probenentnahme und -verarbeitung zu befolgen.
- Bei Wasserproben sind die für die Probenahme und -verarbeitung geeigneten Verfahren gemäß den Richtlinien und lokalen Standards zu befolgen (8).
- Kontaminierte Materialien müssen nach Gebrauch durch Autoklavieren sterilisiert werden, bevor sie entsorgt werden können.
Warnung und Vorsichtsmaßnahmen:
Zur In-vitro-Diagnostik. Nur für den professionellen Gebrauch. Vor dem Öffnen des Behälters das Etikett lesen. Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz tragen. Bei der Handhabung von Proben und Kulturen die üblichen mikrobiologischen Laborpraktiken beachten. Beim Umgang mit klinischen Proben sind die Standardvorkehrungen gemäß den geltenden Richtlinien zu treffen. Sicherheitshinweise finden Sie in den jeweiligen Sicherheitsdatenblättern.
Einschränkungen:
- Einzelne Organismen unterscheiden sich in ihren Wachstumsbedingungen und können auf dem Nährmedium unterschiedliche Wachstumsmuster aufweisen.
- Jede Charge des Nährmediums wurde auf die im Analysezertifikat (COA) aufgeführten Organismen getestet. Anwendern wird empfohlen, das Medium je nach ihren individuellen Anforderungen auch auf andere als die im COA genannten Mikroorganismen zu validieren.
Leistung und Bewertung
Die Leistungsfähigkeit des Mediums ist zu erwarten, wenn es gemäß den Anweisungen auf dem Etikett innerhalb des Verfallsdatums verwendet und bei der empfohlenen Temperatur gelagert wird.
Qualitätskontrolle
Aussehen
Cremefarbenes bis gelbes, homogenes, rieselfähiges Pulver
Gelierung
Fest, vergleichbar mit 1,5%igem Agar-Gel
Farbe und Klarheit des zubereiteten Mediums
In Petrischalen bildet sich ein hellgelbes, klares bis leicht trübes Gel.
Reaktion
Reaktion einer 2,8 % (w/v) wässrigen Lösung bei 25 °C. pH-Wert: 7,4 ± 0,2
pH
7,20-7,60
Kulturelle Reaktion
Produktivität:
Kulturelle Merkmale, die nach einer Inkubation bei 35-37°C über 18-48 Stunden beobachtet wurden.
| Organismus |
Inokulum (KBE) |
Wachstum |
Erholung |
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) |
50-100 |
gut-üppig |
>=70% |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) |
50-100 |
gut-üppig |
>=70% |
| Salmonella Typhi ATCC 6539 |
50-100 |
gut-üppig |
>=70% |
| Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*) |
50-100 |
gut-üppig |
>=70% |
| Streptococcus pyogenes ATCC 19615 |
50-100 |
gut-üppig |
>=70% |
| Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*) |
50-100 |
gut-üppig |
>=70% |
| Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) |
50-100 |
gut-üppig |
>=70% |
| Yersinia enterocolitica ATCC 9610 (00038*) |
50-100 |
gut-üppig |
>=70% |
| Yersinia enterocolitica ATCC 23715 (00160*) |
50-100 |
gut-üppig |
>=70% |
Legende: (*) Zugehörige WDCM-Nummern.
Lagerung und Haltbarkeit
Lagern Sie das Produkt in einem dicht verschlossenen Behälter bei 10–30 °C und das zubereitete Medium bei 20–30 °C. Verwenden Sie es vor dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum. Nach dem Öffnen sollte das Produkt trocken und gut verschlossen aufbewahrt werden, um Klumpenbildung aufgrund der hygroskopischen Eigenschaften des Produkts zu vermeiden. Unsachgemäße Lagerung kann zu Klumpenbildung führen. Lagern Sie das Produkt an einem trockenen, gut belüfteten Ort, geschützt vor extremen Temperaturen und Zündquellen. Verschließen Sie den Behälter nach Gebrauch wieder fest. Die beste Produktleistung wird erzielt, wenn das Produkt innerhalb des angegebenen Verfallsdatums verwendet wird.
Entsorgung
Der Anwender muss die sichere Entsorgung gebrauchter oder unbrauchbarer Zubereitungen dieses Produkts durch Autoklavieren und/oder Verbrennen gewährleisten. Bei der Entsorgung infektiöser Materialien sind die etablierten Laborverfahren einzuhalten. Material, das mit klinischen Proben in Kontakt gekommen ist, muss dekontaminiert und gemäß den geltenden Labortechniken entsorgt werden (5,6).
Referenz
- Lapage S., Shelton J. und Mitchell T., 1970, Methods in Microbiology', Norris J. und Ribbons D., (Hrsg.), Band 3A, Academic Press, London.
- MacFaddin JF, 2000, Biochemische Tests zur Identifizierung medizinischer Bakterien, 3. Auflage, Lippincott, Williams and Wilkins, Baltimore.
- Amerikanische Vereinigung für öffentliche Gesundheit, Standardmethoden zur Untersuchung von Milchprodukten, 1978, 14. Auflage, Washington DC
- Salfinger Y. und Tortorello ML, 2015, Kompendium der Methoden zur mikrobiologischen Untersuchung von Lebensmitteln, 5. Auflage, American Public Health Association, Washington, DC
- Isenberg, HD Handbuch der klinischen mikrobiologischen Verfahren, 2. Auflage.
- Jorgensen, JH, Pfaller, MA, Carroll, KC, Funke, G., Landry, ML, Richter, SS und Warnock, DW (2015) Handbuch der klinischen Mikrobiologie, 11. Auflage. Band 1.
- Wehr HM und Frank JH, 2004, Standardmethoden für die mikrobiologische Untersuchung von Milchprodukten, 17. Auflage, APHA Inc., Washington, DC
- Lipps WC, Braun-Howland EB, Baxter TE, Hrsg. Standardmethoden zur Untersuchung von Wasser und Abwasser, 24. Aufl. Washington DC: APHA Press; 2023.
Sicherheitsdatenblatt (SDB)
