HiMedia Plate Count Agar M091 - Standard Methods Agar for Accurate Microbial Analysis
HiMedia Plate Count Agar M091 - Standard Methods Agar for Accurate Microbial Analysis
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Verwendungszweck
Empfohlen zur Bestimmung der Keimzahl von Mikroorganismen in Lebensmitteln, Wasser und Abwasser.
Zusammensetzung**
| Zutaten | g / L |
|---|---|
| Trypton | 5.000 |
| Hefeextrakt | 2.500 |
| Dextrose (Glucose) | 1.000 |
| Agar | 15.000 |
Endgültiger pH-Wert (bei 25 °C): 7,0±0,2
Die Formel wurde an die Leistungsparameter angepasst und standardisiert.
Wegbeschreibung
23,5 g in 1000 ml gereinigtem/destilliertem Wasser suspendieren. Zum vollständigen Auflösen erhitzen. 15 Minuten bei 15 psi (121 °C) autoklavieren. Auf 45–50 °C abkühlen lassen. Gut mischen und in sterile Petrischalen füllen.
Prinzip und Auslegung
Plate Count Agar wird gemäß der Beschreibung von Buchbinder et al. (1) hergestellt und von der APHA (2,3,4) und der FDA (5) empfohlen. Trypton liefert stickstoff- und kohlenstoffhaltige Verbindungen, langkettige Aminosäuren und weitere essentielle Nährstoffe. Hefeextrakt liefert Vitamin-B-Komplex. Die APHA empfiehlt die Anwendung des Ausgießverfahrens. Die Proben werden verdünnt und die entsprechenden Verdünnungen in Petrischalen gegeben. Steriler, flüssiger Agar wird hinzugefügt und die Schalen werden vorsichtig geschwenkt, um eine gleichmäßige Durchmischung der Probe mit dem Agar zu gewährleisten. Das Ausgießverfahren ist dem Oberflächenbeimpfungsverfahren vorzuziehen, da es höhere Ergebnisse liefert. Plate Count Agar eignet sich auch zur Bestimmung der Bakterienzahl in Reinräumen.
Art der Probe
Lebensmittel- und Milchproben; Wasserproben
Probenentnahme und -behandlung:
Bei Lebensmittel- und Milchproben sind die in den Richtlinien (3,4) beschriebenen Verfahren zur Probenahme und -verarbeitung anzuwenden. Bei Wasserproben sind die in den Richtlinien und lokalen Normen (2) beschriebenen Verfahren zur Probenahme und -verarbeitung anzuwenden. Kontaminierte Materialien müssen nach Gebrauch vor der Entsorgung autoklaviert werden.
Warnung und Vorsichtsmaßnahmen:
Lesen Sie vor dem Öffnen des Behälters das Etikett. Tragen Sie Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz. Beachten Sie beim Umgang mit Proben und Kulturen die üblichen mikrobiologischen Laborpraktiken. Standardvorkehrungen gemäß den geltenden Richtlinien sind beim Umgang mit Proben zu treffen. Sicherheitshinweise finden Sie in den jeweiligen Sicherheitsdatenblättern.
Einschränkungen:
- Einzelne Organismen unterscheiden sich in ihren Wachstumsbedingungen und können auf dem Nährmedium unterschiedliche Wachstumsmuster aufweisen.
- Jede Charge des Nährmediums wurde auf die im Analysezertifikat (COA) aufgeführten Organismen getestet. Anwendern wird empfohlen, das Medium je nach ihren individuellen Anforderungen auch auf andere als die im COA genannten Mikroorganismen zu validieren.
Leistung und Bewertung
Die Leistungsfähigkeit des Mediums ist zu erwarten, wenn es gemäß den Anweisungen auf dem Etikett innerhalb des Verfallsdatums verwendet und bei der empfohlenen Temperatur gelagert wird.
Qualitätskontrolle
Aussehen Cremefarbenes bis gelbes, körniges Medium.
Gelierung Fest, vergleichbar mit 1,5%igem Agar-Gel
Farbe und Klarheit des zubereiteten Mediums In Petrischalen bildet sich ein hellgelbes, klares bis leicht trübes Gel.
Reaktion Reaktion einer 2,35 % (w/v) wässrigen Lösung bei 25 °C. pH-Wert: 7,0 ± 0,2
Kulturelle Reaktion
Kulturelle Merkmale, die nach einer Inkubation bei 35 - 37 °C über 18-48 Stunden beobachtet wurden.
| Organismus | Inokulum (KBE) | Wachstum | Erholung |
|---|---|---|---|
| ** Bacillus spizizenii ATCC 6633 (00003*) | 50-100 | üppig | >=70% |
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) | 50-100 | üppig | >=70% |
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | 50-100 | üppig | >=70% |
| Lactobacillus rhamnosus ATCC 9595 | 50-100 | üppig | >=70% |
| Staphylococcus aureus Unterart. aureus ATCC 25923 (00034*) | 50-100 | üppig | >=70% |
| Streptococcus pyogenes ATCC 19615 | 50-100 | üppig | >=70% |
Schlüssel: *Entsprechende WDCM-Nummern. **Früher bekannt als Bacillus subtilis Unterart. Spizizenii
Lagerung und Haltbarkeit
Lagern Sie das Produkt in einem dicht verschlossenen Behälter bei 10–30 °C und das zubereitete Medium bei 20–30 °C. Verwenden Sie es vor dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum. Nach dem Öffnen sollte das Produkt trocken und luftdicht gelagert werden. Verschließen Sie die Flasche fest, um Klumpenbildung aufgrund der hygroskopischen Eigenschaften des Produkts zu vermeiden. Unsachgemäße Lagerung kann zu Klumpenbildung führen. Lagern Sie das Produkt an einem trockenen, gut belüfteten Ort, geschützt vor extremen Temperaturen und Zündquellen. Verschließen Sie den Behälter nach Gebrauch wieder fest. Die beste Produktleistung wird erzielt, wenn das Produkt innerhalb des angegebenen Verfallsdatums verwendet wird.
Entsorgung
Der Anwender muss die sichere Entsorgung gebrauchter oder unbrauchbarer Zubereitungen dieses Produkts durch Autoklavieren und/oder Verbrennen gewährleisten. Bei der Entsorgung infektiöser Materialien sind die etablierten Laborverfahren zu befolgen. Material, das mit der Probe in Kontakt gekommen ist, muss dekontaminiert und gemäß den geltenden Labortechniken entsorgt werden (6,7).
Referenz
- Buchbinder L., Baris Y., Aldd E., Reynolds E., Dilon E., Pessin V., Pincas L. und Strauss A., 1951, Publ. Hlth. Rep., 66:327.
- Lipps WC, Braun-Howland EB, Baxter TE, Hrsg. Standardmethoden zur Untersuchung von Wasser und Abwasser, 24. Aufl. Washington DC: APHA Press; 2023.
- Salfinger Y. und Tortorello ML, 2015, Kompendium der Methoden zur mikrobiologischen Untersuchung von Lebensmitteln, 5. Auflage, American Public Health Association, Washington, DC
- Wehr HM und Frank JH, 2004, Standardmethoden für die mikrobiologische Untersuchung von Milchprodukten, 17. Auflage, APHA Inc., Washington, DC
- FDA Bacteriological Analytical Manual, 2005, 18. Auflage, AOAC, Washington, DC.
- Isenberg, HD Handbuch der klinischen mikrobiologischen Verfahren. 2. Auflage.
- Jorgensen, JH, Pfaller, MA, Carroll, KC, Funke, G., Landry, ML, Richter, SS und Warnock, DW (2015) Handbuch der klinischen Mikrobiologie, 11. Auflage. Band 1.
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