Empfohlen als selektives Anreicherungsmedium für Salmonella und möglicherweise Shigella sonnei aus Fäkalien, Urin, Wasser und Lebensmitteln.
Bestimmungsgemäße Verwendung
Empfohlen als selektives Anreicherungsmedium für Salmonellen und möglicherweise Shigella sonnei aus Fäkalien, Urin, Wasser und Nahrungsmitteln.
Zusammensetzung**
Zutaten
| Zutaten |
g/L |
| Trypton |
5.000 |
| Laktose |
4.000 |
| Dinatriumhydrogenphosphat |
10.000 |
| L-Cystin |
0,010 |
| End-pH-Wert (bei 25 °C) |
7,0±0,2 |
Die Formel wurde an die Leistungsparameter angepasst und standardisiert.
Wegbeschreibung
19,01 g in 1000 ml gereinigtem/destilliertem Wasser suspendieren. 4 g Natriumhydrogenselenit (M1079B) zugeben. Erwärmen, bis sich das Medium vollständig gelöst hat. In sterile Reagenzgläser abfüllen. 10 Minuten in einem kochenden Wasserbad oder über freiem Dampf sterilisieren. NICHT AUTOKLAVIERN . Übermäßiges Erhitzen ist schädlich. Das zubereitete Medium ist zu verwerfen, wenn eine große Menge Selenit reduziert ist (erkennbar an einem roten Niederschlag am Boden des Röhrchens/der Flasche).
Notiz: Anstelle von M1079B können DD056 -Natriumbiselenit-Scheiben (1 Scheibe pro 10 ml Medium) oder DB001 -Natriumbiselenit-Knospe (1 Knospe pro 100 ml Medium) nach dem Kochen zum Medium hinzugefügt werden.
Prinzip und Auslegung
Klett (1) wies als Erster die selektiven Hemmwirkungen von Selenit nach, und Guth (2) nutzte es zur Isolierung von Salmonella Typhi . Leifson untersuchte Selenit eingehend und entwickelte die Nährmedien. Das Selenit-Cystin-Medium ist eine Modifikation der Leifson-Formel (3) mit zusätzlichem Cystin (4). Modifikationen der ursprünglichen Zusammensetzung und ähnliche Medien werden von AOAC, APHA, USP usw. empfohlen (3–7, 8, 9). Anreicherungsmedien werden routinemäßig zum Nachweis von Krankheitserregern in Stuhlproben eingesetzt, da diese nur in sehr geringer Anzahl in der Darmflora vorkommen. Selenit-Cystin-Bouillon eignet sich zum Nachweis von Krankheitserregern in Stuhlproben. Salmonellen in den nicht-akuten Stadien der Erkrankung, wenn die Erreger im Stuhl in geringer Anzahl vorkommen, und für epidemiologische Studien zur Verbesserung des Nachweises geringer Erregerzahlen bei asymptomatischen oder genesenden Patienten (10).
Trypton liefert stickstoff- und kohlenstoffhaltige Verbindungen, langkettige Aminosäuren, Vitamine und andere essentielle Nährstoffe. Laktose stabilisiert den pH-Wert des Mediums. Selenit wird durch Bakterienwachstum abgebaut, wobei Alkali entsteht. Ein Anstieg des pH-Werts verringert die Toxizität des Selenits und führt zu einem übermäßigen Wachstum anderer Bakterien. Die durch die Laktosefermentation entstehende Säure trägt zur Aufrechterhaltung eines neutralen pH-Werts bei. Natriumphosphat stabilisiert den pH-Wert und verringert ebenfalls die Toxizität von Selenit. L-Cystin verbessert die Regeneration von … Salmonellen .
Die angereicherte Bouillon wird auf Differenzierungsmedien wie Bismutsulfit-Agar (M027), Brillantgrün-Agar (M016), XLD-Agar (M031) usw. subkultiviert. Die Bouillon sollte nicht länger als 24 Stunden inkubiert werden, da die hemmende Wirkung von Selenit nach 6-12 Stunden Inkubation nachlässt (11).
Art der Probe
Klinische Untersuchungen: Stuhl-, Urin-, Wasserproben und Nahrungsmittelproben.
Probenentnahme und -behandlung
Bei klinischen Proben sind die für den Umgang mit Proben geeigneten Techniken gemäß den festgelegten Richtlinien zu befolgen (12,13).
Bei Lebensmittel- und Milchproben sind die in den Richtlinien (5,7) beschriebenen geeigneten Techniken zur Probenahme und -verarbeitung zu befolgen.
Bei Wasserproben sind geeignete Verfahren für die Probenahme und -verarbeitung gemäß den Richtlinien und lokalen Standards anzuwenden (9).
Kontaminierte Materialien müssen nach Gebrauch durch Autoklavieren sterilisiert werden, bevor sie entsorgt werden können.
Warnung und Vorsichtsmaßnahmen
Zur In-vitro-Diagnostik. Nur für den professionellen Gebrauch. Vor dem Öffnen des Behälters das Etikett lesen. Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz tragen. Bei der Handhabung von Proben und Kulturen die üblichen mikrobiologischen Laborpraktiken beachten. Beim Umgang mit klinischen Proben sind die Standardvorkehrungen gemäß den geltenden Richtlinien zu treffen. Sicherheitshinweise finden Sie in den jeweiligen Sicherheitsdatenblättern.
Einschränkungen
- Eine Überhitzung des Mediums führt zum Verlust der Selektivität des Mediums.
- Zur Bestätigung müssen weitere Isolierungs- und biochemische Tests durchgeführt werden.
Leistung und Bewertung
Die Leistungsfähigkeit des Mediums ist zu erwarten, wenn es gemäß den Anweisungen auf dem Etikett innerhalb des Verfallsdatums verwendet und bei der empfohlenen Temperatur gelagert wird.
Qualitätskontrolle
Aussehen
Cremefarbenes bis hellgelbes, homogenes, rieselfähiges Pulver.
Farbe und Klarheit des zubereiteten Mediums
Klare, cremefarbene bis gelbe Lösung ohne Niederschlag.
Reaktion
Reaktion von 1,9 % (w/v) Medium mit 0,4 % (w/v) wässriger Selenitlösung bei 25 °C. pH-Wert: 7,0 ± 0,2
pH
6,80-7,20
Kulturelle Reaktion
Kulturelle Eigenschaften, die bei Zugabe von Natriumhydrogenselenit (M1079B) nach Subkultivierung auf MacConkey-Agar (M081) nach einer Inkubation bei 35-37°C für 18-24 Stunden beobachtet wurden.
Lagerung und Haltbarkeit
Lagern Sie das Produkt in einem dicht verschlossenen Behälter bei 10–30 °C und das zubereitete Medium bei 2–8 °C. Verwenden Sie das Produkt vor dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum. Nach dem Öffnen sollte das Produkt trocken und gut verschlossen aufbewahrt werden, um Klumpenbildung aufgrund der hygroskopischen Eigenschaften des Produkts zu vermeiden. Unsachgemäße Lagerung kann zu Klumpenbildung führen. Lagern Sie das Produkt an einem trockenen, gut belüfteten Ort, geschützt vor extremen Temperaturen und Zündquellen. Verschließen Sie den Behälter nach Gebrauch wieder fest. Die beste Produktleistung wird erzielt, wenn das Produkt innerhalb des angegebenen Verfallsdatums verwendet wird.
Entsorgung
Der Anwender muss die sichere Entsorgung gebrauchter oder unbrauchbarer Zubereitungen dieses Produkts durch Autoklavieren und/oder Verbrennen gewährleisten. Bei der Entsorgung infektiöser Materialien sind die etablierten Laborverfahren einzuhalten. Material, das mit klinischen Proben in Kontakt gekommen ist, muss dekontaminiert und gemäß den geltenden Labortechniken entsorgt werden (12,13).
Referenz
- Klett A., 1900, Zeitsch Für Hyg. Und. Infekt., 33: 137.
- Guth F., 1926, Zbl. Bakt. I. Orig., 77:487.
- Leifson E., 1936, Am. J. Hyg., 24(2): 423.
- North WR und Bartran MT, 1953, Appl. Microbiol., 1:130.
- Salfinger Y. und Tortorello ML, 2015, Kompendium der Methoden zur mikrobiologischen Untersuchung von Lebensmitteln, 5. Auflage, American Public Health Association, Washington, DC
- United States Pharmacopoeia, 2002, USP 25/NF 20, Asian Edition, United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD.
- Wehr HM und Frank JH, 2004, Standardmethoden für die mikrobiologische Untersuchung von Milchprodukten, 17. Auflage, APHA Inc., Washington, DC
- AOAC, 1978, Bacteriological Analytic Manual, 5. Auflage, AOAC, Washington, DC
- Lipps WC, Braun-Howland EB, Baxter TE, Hrsg. Standardmethoden zur Untersuchung von Wasser und Abwasser, 24. Aufl. Washington DC: APHA Press; 2023.
- Kelly, Brenner und Farmer, 1985, Handbuch der klinischen Mikrobiologie, 4. Aufl., Lennett und andere (Hrsg.), ASM, Washington, DC
- Chattopadhyay W. und Pilford JN, 1976, Med.Lab. Sci., 33:191.
- Isenberg, HD Handbuch der klinischen mikrobiologischen Verfahren. 2. Auflage.
- Jorgensen, JH, Pfaller, MA, Carroll, KC, Funke, G., Landry, ML, Richter, SS und Warnock, DW (2015) Handbuch der klinischen Mikrobiologie, 11. Auflage. Band 1.
Sicherheitsdatenblatt (SDB)
